У відповідь на пошкодження тканин та запалення організм виробляє, серед іншого, так звані білки “гострої фази” (АРР) у печінці. Сироватковий амілоїд A (САА) є важливим прекурсором бета-амілоїду (ПБА) у багатьох видів, з низькими концентраціями в сироватці під час нормального гомеостазу та швидкою відповіддю під час і після запалення.

Фізіологічна концентрація САА у кішки нижче 10 мг/л, у коня нижче 30 мг/л. Різке підвищення рівня САА більш ніж у 1000 разів відбувається протягом кількох годин (4–6 годин, пік через 36–48 годин) через запалення, інфекції, травми або порушення загоєння ран (кінь). Як тільки запалення стихає, концентрація САА знижується (період напіврозпаду 24–48 годин).

Вимірювання САА у ветеринарії дозволяє не тільки визначити клінічні або субклінічні запалення, але й надійно контролювати курс та терапію. Ще однією перевагою визначення САА є його незалежність від антибіотиків, глюкокортикоїдів або стресу.

SAA-CHECK-1 містить:

• 10 тест-касет з моноклональними антитілами
• 10 Флаконів “A”з 2,0 мл буфера
• 5 флаконів “A” (без буфера)
• 20 наконечників для піпеток (10 мкл)
• 5 наконечників для піпеток (200 мкл)
• інструкцію

ЗРАЗОК ТЕСТУВАННЯ

• Зразок повинен бути зібраний у лабораторних умовах
• Тест можна проводити з антикоагульованою (ЕДТА, цитрат або гепарин) цільною кров’ю, плазмою або сироваткою собаки.

Не слід використовувати цільну кров без антикоагулянта!

• УВАГА: Частково заповнені та/або недостатньо змішані пробірки з ЕДТА, цитратом або гепарином може створити ефект інтерференції (забагато антикоагулянту), що призведе до неспецифічних результатів тесту.

• Цільну кров (з антикоагулянтом) необхідно протестувати протягом 4 годин з моменту збирання.

• Зразок матеріалу слід перевірити відразу після відбору! УВАГА: При 15–25 °C плазму або сироватку можна зберігати до 24 годин. Для тривалого зберігання зберігати при мінімум –20 °C (максимум 3 місяці). Не зберігати в холодильнику! Уникайте повторного заморожування та розморожування.

• Перед тестуванням добре перемішайте зразок!

• Зразок, а також усі компоненти тест-набору, на момент нанесення повині досягати кімнатної температури (15–25 °C).

ПІДГОТОВКА EASYREADER®

• Перед початком підготовки зразка / процедури тестування, будь ласка, прочитайте Інструкцію з використання!

EASYREADER® можна використовувати в режимі Plus (PM) та в Easy Mode.

• Щоб переключитися з EM на PM, натисніть синю кнопку Plus Mode у верхньому правому куті дисплея.

• Щоб переключитися з PM на EM, спочатку натисніть кнопку «Main», потім кнопку «Logout», а потім у нижньому лівому куті синю кнопку «Immediate».

• Важливо: увімкніть EASYREADER® і дайте йому прогрітися щонайменше 30 хвилин! Рідер попередньо налаштовано таким чином, що час автоматичного вимкнення дезактивовано, щоб гарантувати постійну температуру інкубації в Рідері.

Якщо вам потрібен певний час вимкнення, ви можете змінити його, як описано в інструкції з використання.
Підготуйте «Blank Device»! У надзвичайних ситуаціях також можна використати тестову касету, щойно вийняту з фольгованого пакета.

ПІДГОТОВКА ЗРАЗКА

1. Позначте ідентифікатором тварини флакон “А”, що містить буфер.
2. Відкрутіть флакон
3. а Плазма/сироватка: тримайте піпетку під кутом до внутрішньої стінки флакону. Додайте 10 мкл зразка у флакон (Мал. 1).

3.б Цільна кров (з антикоагулянтом): тримайте піпетку під кутом до внутрішньої стінки флакона. Додайте 10 мкл зразкау флакон (Мал. 1). Повторіть цей крок із новим наконечником.

4. Закрийте флакон

5. Ретельно перемішайте суміш буфера та зразка, перевертаючи флакон догори дном кілька разів протягом 10 секунд (Мал. 2).

ПРОЦЕДУРА ТЕСТУВАННЯ

1. Виберіть потрібний тип тесту (тут: SAA).
2. Вставте порожню тест-касету та вийміть її після успішного порожнього вимірювання.
3. Введіть дані пацієнта в Reader
4. Виберіть «Countdown» (Зворотний відлік) або «Immediate» (Негайно).

«Countdown» (Зворотний відлік): внутрішній таймер EasyReader запускається автоматично. Тест-касета зчитується після 10 хвилин інкубації. Рекомендується «Countdown», оскільки EasyReader має постійну температуру інкубації всередині

«Immediate» (Негайно): Ви самі повинні зупинити час інкубації (за допомогою секундоміра). Як тільки настане час, помістіть тест-касету в тримач та почніть випробування Start.

5. Вийміть тест-касету з фольгованого пакета перед використанням.

6. Позначте тестову касету ідентифікатором тварини.

7. Відламайте кінчик флакону, що містить суміш буфера та зразка (Мал. 3).

8. Використовуйте піпетку, щоб додати 4 краплі (150 мкл) суміші до лунки тест-касети (тримайте піпетку вертикально Мал.4). Уникайте бульбашок і торкання тестової касети!

9. «Countdown» режим: як тільки рожево-фіолетовий потік буде видно у лунці результатів (Мал. 5), помістіть тест-касету в Рідерлункою зі зразком праворуч (Мал. 6). Інкубація починеться автоматично.

«Immediate» режим: як тільки рожево-фіолетовий потік буде видно у лунці результатів (Мал. 5), запустіть секундомір із зазначеним часом інкубації (5 хвилин). Після закінчення часу інкубації помістіть тест-касету в Рідерлункою зі зразком праворуч (Мал. 6) для зчитування. Увага! EasyReader негайно починає вимірювання!

10.  Результат тесту (в нг/мл) можна прочитати через 5 хвилин безпосередньо на Рідеріта роздрукувати автоматично після закінчення часу інкубації.

ІНТЕРПРЕТАЦІЯ РЕЗУЛЬТАТІВ

Інтерпретація результату тесту завжди повинна базуватися на анамнестичних та клінічних даних, а також необхідно брати до уваги терапевтинчі та профілактики заходи.

Кішка:

• Рівень САА нижче 10 мг/л = захворювання/розлади малоймовірні (1, 2).
• Підвищені рівні SAA:
– Травма: середнє значення 62 мг/л
– Ниркова недостатність: середнє значення 31 мг/л
– Інфекційні захворювання: середнє значення 48 мг/л
– Пухлини: середнє значення 17 мг/л

Кінь:

• Рівень SAA нижче 30 мг/л = системне запалення малоймовірне
• Рівень SAA в межах 37 та 1609 мг/л (середнє значення: 343 мг/л) = ймовірно локальне запалення

• Рівень SAA в межах 688 та 4000 мг/л (середнє значення: 1583 мг/л) = розвивається системне запалення і потребує уваги (3).