FASTest® ENCEPH — імунохроматографічний тест для якісного виявлення антитіл проти Encephalitozoon cuniculi в сироватці крові кролів.

Цикл розвитку
- аліментарним – при вживанні води чи корму, забруднених спорами цього збудника;
- утробним – спори здатні проникати через материнську та плодову плаценту й інвазувати органи плоду;
- контамінаційним – при вдиханні пилу зі спорами під час механічного очищення кліток чи інших процедур, пов’язаних з пилоутворенням у місцях утримання тварин
Патогенез та імунітет
Клінічні ознаки
КОМПОНЕНТИ НАБОРУ
- Тест-касети з антигенами Encephalitozoon cuniculi
- Флакони “А” з 1,0 мл буферного розчинника
- Одноразові піпетки (10 мкл)
- Реакційні пробірки (0,5 мл)
- Інструкція із застосування
ІНФОРМАЦІЯ ПРО ЗРАЗОК ДОСЛІДЖЕННЯ
Для дослідження знадобиться рівно 10 мкл (1 крапля пластикової піпетки, що додається) теплої сироватки (15-25 °С).
Не можна використовувати нативну кров без антикоагулянту, а також антикоагулянти цитрат та гепарин.
Перед використанням добре перемішайте зразок!
Неохолоджена (15-25 °C) сировотка повинена бути протестований протягом 4 годин!
При температурі 2-8 °C, сировотка можна зберігати до 4 днів.
Зразки сировотки зберігати при температурі -20 °C.
Майте на увазі, що матеріал зразка, а також всі використані компоненти тест-набору повинні бути кімнатної температури на момент застосування.
Ендогенні та екзогенні речовини зразка, наприклад: альбумін, фібриноген, ліпіди, С-реактивний білок, гетерофільні антитіла, особливо типу IgA, а також в’язкість, значення рН та антикоагулянти), а також нативна кров можуть викликати перешкоди (матричні ефекти), які можуть вплинути на цільове вимірювання.
Це може призвести до погіршення тестування та/або неспецифічних реакцій.
ЗБІР ТА ПІДГОТОВКА ЗРАЗКІВ
- Підготовка зразків не потрібна
- Якщо у Вас немає можливості отримати сироватку за допомогою центрифугування або пробірки для відділення сироватки (SST), Ви можете заповнити реакційну пробірку з тест набору – 500 мкл нативною кров’ю. Як тільки сироватка відокремиться (зазвичай приблизно через 15-30 хвилин), Ви можете продовжити з кроку 5 (Процедура тестування).
- ПОРАДА: Перші 0,5 мл крові містять більше факторів згортання. В ідеалі, ви повинні використовувати саме їх.
ПРОЦЕДУРА ТЕСТУВАННЯ
1. Вийміть тест-касету з упаковки з фольги незадовго до використання. Покладіть її на рівну поверхню.
2. Відберіть зразок до позначки (=^ 10 мкл об’єму зразка) за допомогою одноразової пластикової піпетки. Меніск повинен знаходитися над чорною лінією ( рис.1). Помістіть весь об’єм зразка у флакон-крапельницю А (тримайте піпетку вертикально, рис. 2).

3. Ретельно перемішайте суміш зразок-буфер (рис. 3).
4. Зламайте кінчик флакона-піпетки А, тримайте флакон-піпетку А вертикально, викиньте першу краплю і додайте 3 краплі (приблизно 120-150 мкл) у вікно для зразка А тест-касети (рис. 4).

ЗЧИТУВАННЯ РЕЗУЛЬТАТУ ТЕСТУ
Прочитайте результат тесту через 10 хвилин після того, як три краплі SBM були додані у вікно для зразків А.
ПОЗИТИВНИЙ РЕЗУЛЬТАТ ТЕСТУ (рис.5)
З’являється рожево-фіолетова ТЕСТОВА лінія будь-якої інтенсивності (від дуже слабкої до сильно інтенсивної) та рожево-фіолетова КОНТРОЛЬНА лінія.
НЕГАТИВНИЙ РЕЗУЛЬТАТ ТЕСТУ (рис.6)
З’являється лише рожево-фіолетова КОНТРОЛЬНА лінія. Ця лінія, незалежно від її інтенсивності, вказує на те, що тест виконано правильно.
НЕДІЙСНИЙ РЕЗУЛЬТАТ ТЕСТУ
Не з’являється КОНТРОЛЬНА ЛІНІЯ. Тест необхідно повторити, використовуючи нову тест-касету.

ІНТЕРПРЕТАЦІЇ РЕЗУЛЬТАТІВ
Інтерпретація результату тесту завжди повинна ґрунтуватися на анамнестичних та клінічних даних, а також на можливостях терапії та профілактики.
Будь-яка неописана зміна кольору або контуру В та С (наприклад, сіруваті, тінеподібні лінії) повинна розглядатися як неспецифічна реакція, отже, як негативний результат тесту.
Через наявність на тестовій мембрані антикоагульованої цільної крові та/або червоного гемоглобіну, зумовленого гемолітичними зразками крові, інтенсивність лінії В, особливо у випадку слабких позитивних зразків, може бути від слабкої до нульової.
Для виявлення антитіл, як відомо, стандартною є двоетапна діагностика. Перший етап починається зі скринінгового тесту на антитіла IgG в клініці, наприклад, FASTest® ENCEPH.
Негативна реакція FASTest® ENCEPH через 14-28 днів після зараження з високою ймовірністю виключає гостру інфекцію або попередній контакт з E. cuniculi. Для диференціальної діагностики слід дослідити наступні захворювання: середній/внутрішній отит (простудний комплекс кроликів), зовнішній отит (Psoroptes cuniculi), травма, токсоплазмоз, неоплазія, герпетична інфекція, інтоксикація.
Підозра на активний енцефалітозооноз підтверджується поєднанням FASTest® ENCEPH та відповідної клініки. Крім того, слід взяти два зразки сироватки з інтервалом 2-4 тижні для кількісного визначення титру антитіл за допомогою непрямого імунофлуоресцентного тесту (MegaFLUO® ENCEPHALITOZOON cuniculi) або ІФА (MegaELISA® ENCEPHALITOZOON cuniculi) для визначення кінцевого титру або збільшення титру в 2-4 рази (сероконверсія).


