FASTest®ENCEPH

Ціни відображаються зареєстрованим користувачам

  • Зразок тестування: сировотка
  • Чутливість 98,5%
  • Специфічність 100%
  • Зберігання при кімнатній температурі (15-25°C)
  • Упаковка: 6 тестів
Кролі

FASTest® ENCEPH — імунохроматографічний тест для якісного виявлення антитіл проти Encephalitozoon cuniculi в сироватці крові кролів.

Енцефалозооноз кролів (синоніми: енцефалітозооноз, encephalitozoon (nosema) cuniculi) – зооантропонозний протозооз тварин переважно з хронічним або безсимптомним перебігом. Спричиняється дрібним облігатним внутрішньоклітинним паразитом E.cuniculi роду Encephalitozoon, що належить до мікроспоридій і частіше вражає центральну нервову систему (головний та спинний мозок), а також нирки, печінку, селезінку, серце, легені та очі. Два інших види цього роду – E.hellem та E.intestinalis здатні також інфікувати ссавців.
Цикл розвитку
Інвазовані кролі через місяць після зараження починають виділяти спори збудника з сечею; цей процес триває протягом кількох тижнів. Інвазування тварин може відбуватися кількома шляхами:
  • аліментарним – при вживанні води чи корму, забруднених спорами цього збудника;
  • утробним – спори здатні проникати через материнську та плодову плаценту й інвазувати органи плоду;
  • контамінаційним – при вдиханні пилу зі спорами під час механічного очищення кліток чи інших процедур, пов’язаних з пилоутворенням у місцях утримання тварин
Патогенез та імунітет
Внутрішньоклітинне розмноження паразитів у тканинах нервової системи та паренхіматозних органів спричиняє інтенсивне руйнування їх клітин. Вивільнені спори проникають в інші клітини, де процес повторюється кілька разів. Інвазії, спричинені Е. сuniculi, у кролів зазвичай мають хронічний перебіг–від кількох тижнів до кількох місяців. Перші зміни тканин помітні у нирках, печінці та легенях, тоді як мозок ще не уражений, але десь за три місяці найзначніші зміни спостерігають саме в ньому. У цей час паразити у легенях і печінці відсутні. Антитіла проти Е.cuniculi виробляються і зберігаються протягом тривалого періоду у зв’язку з хронічним характером інфекції.
Клінічні ознаки
У кролів під впливом збудників енцефалозоонозу можуть окремо або в комбінації проявлятися три форми захворювання. Неврологічні ознаки явно домінують у клінічних проявах інвазії, спричиненої Е.cuniculi. Найчастіше проявляються вестибулярні захворювання, такі як нахиляння голови, атаксія, кружляння й обертальні рухи навколо осі тіла. При цьому загальний стан і апетит здебільшого не порушені. Інші неврологічні симптоми, які відзначали при перебігу енцефалозоонозу: судоми, парези, тремор голови, похитування або кивання в стані спокою та викривлення шиї.
При ураженні нирок частіше помічають хронічний інтерстиціальний нефрит із субклінічним перебігом. Значні порушення функцій нирок відзначають рідко. У хворих кролів помітні неспецифічні ознаки– втрата апетиту, схуднення, млявість та зневоднення. Хронічна ниркова недостатність також може спричинити анемію або остеодистрофію, через яку ймовірні переломи трубчастих кісток.
Факокластичний увеїт (травма кришталика) спостерігали у багатьох видів свійських тварин, але кролі унікальні тим, що розрив капсули відбувається без попереднього травматичного пошкодження. Внаслідок утробного інвазування найчастіше страждає від увеїту молодняк кролів. При енцефалозоонозі уражається переважно одне око. Власники кролів часто повідомляють про видиму білу масу в оці.

КОМПОНЕНТИ НАБОРУ

  • Тест-касети з антигенами Encephalitozoon cuniculi
  • Флакони “А” з 1,0 мл буферного розчинника
  • Одноразові піпетки (10 мкл)
  • Реакційні пробірки (0,5 мл)
  • Інструкція із застосування
ІНФОРМАЦІЯ ПРО ЗРАЗОК ДОСЛІДЖЕННЯ

Для дослідження знадобиться рівно 10 мкл (1 крапля пластикової піпетки, що додається) теплої сироватки (15-25 °С).

Не можна використовувати нативну кров без антикоагулянту, а також антикоагулянти цитрат та гепарин.

Перед використанням добре перемішайте зразок!

Неохолоджена (15-25 °C) сировотка повинена бути протестований протягом 4 годин!

При температурі 2-8 °C, сировотка можна зберігати до 4 днів.

Зразки сировотки зберігати при температурі -20 °C.

Майте на увазі, що матеріал зразка, а також всі використані компоненти тест-набору повинні бути кімнатної температури на момент застосування.

Ендогенні та екзогенні речовини зразка, наприклад: альбумін, фібриноген, ліпіди, С-реактивний білок, гетерофільні антитіла, особливо типу IgA, а також в’язкість, значення рН та антикоагулянти), а також нативна кров можуть викликати перешкоди (матричні ефекти), які можуть вплинути на цільове вимірювання.
Це може призвести до погіршення тестування та/або неспецифічних реакцій.

ЗБІР ТА ПІДГОТОВКА ЗРАЗКІВ
  • Підготовка зразків не потрібна
  • Якщо у Вас немає можливості отримати сироватку за допомогою центрифугування або пробірки для відділення сироватки (SST), Ви можете заповнити реакційну пробірку з тест набору – 500 мкл нативною кров’ю. Як тільки сироватка відокремиться (зазвичай приблизно через 15-30 хвилин), Ви можете продовжити з кроку 5 (Процедура тестування).
  • ПОРАДА: Перші 0,5 мл крові містять більше факторів згортання. В ідеалі, ви повинні використовувати саме їх.
ПРОЦЕДУРА ТЕСТУВАННЯ

1. Вийміть тест-касету з упаковки з фольги незадовго до використання. Покладіть її на рівну поверхню.
2. Відберіть зразок до позначки (=^ 10 мкл об’єму зразка) за допомогою одноразової пластикової піпетки. Меніск повинен знаходитися над чорною лінією ( рис.1). Помістіть весь об’єм зразка у флакон-крапельницю А (тримайте піпетку вертикально, рис. 2).


3. Ретельно перемішайте суміш зразок-буфер (рис. 3).
4. Зламайте кінчик флакона-піпетки А, тримайте флакон-піпетку А вертикально, викиньте першу краплю і додайте 3 краплі (приблизно 120-150 мкл) у вікно для зразка А тест-касети (рис. 4).

ЗЧИТУВАННЯ РЕЗУЛЬТАТУ ТЕСТУ

Прочитайте результат тесту через 10 хвилин після того, як три краплі SBM були додані у вікно для зразків А.

ПОЗИТИВНИЙ РЕЗУЛЬТАТ ТЕСТУ (рис.5)

З’являється рожево-фіолетова ТЕСТОВА лінія будь-якої інтенсивності (від дуже слабкої до сильно інтенсивної) та рожево-фіолетова КОНТРОЛЬНА лінія.

НЕГАТИВНИЙ РЕЗУЛЬТАТ ТЕСТУ (рис.6)

З’являється лише рожево-фіолетова КОНТРОЛЬНА лінія. Ця лінія, незалежно від її інтенсивності, вказує на те, що тест виконано правильно.

НЕДІЙСНИЙ РЕЗУЛЬТАТ ТЕСТУ

Не з’являється КОНТРОЛЬНА ЛІНІЯ. Тест необхідно повторити, використовуючи нову тест-касету.

 

ІНТЕРПРЕТАЦІЇ РЕЗУЛЬТАТІВ

Інтерпретація результату тесту завжди повинна ґрунтуватися на анамнестичних та клінічних даних, а також на можливостях терапії та профілактики.

Будь-яка неописана зміна кольору або контуру В та С (наприклад, сіруваті, тінеподібні лінії) повинна розглядатися як неспецифічна реакція, отже, як негативний результат тесту.

Через наявність на тестовій мембрані антикоагульованої цільної крові та/або червоного гемоглобіну, зумовленого гемолітичними зразками крові, інтенсивність лінії В, особливо у випадку слабких позитивних зразків, може бути від слабкої до нульової.

Для виявлення антитіл, як відомо, стандартною є двоетапна діагностика. Перший етап починається зі скринінгового тесту на антитіла IgG в клініці, наприклад, FASTest® ENCEPH.

Негативна реакція FASTest® ENCEPH через 14-28 днів після зараження з високою ймовірністю виключає гостру інфекцію або попередній контакт з E. cuniculi. Для диференціальної діагностики слід дослідити наступні захворювання: середній/внутрішній отит (простудний комплекс кроликів), зовнішній отит (Psoroptes cuniculi), травма, токсоплазмоз, неоплазія, герпетична інфекція, інтоксикація.

Підозра на активний енцефалітозооноз підтверджується поєднанням FASTest® ENCEPH та відповідної клініки. Крім того, слід взяти два зразки сироватки з інтервалом 2-4 тижні для кількісного визначення титру антитіл за допомогою непрямого імунофлуоресцентного тесту (MegaFLUO® ENCEPHALITOZOON cuniculi) або ІФА (MegaELISA® ENCEPHALITOZOON cuniculi) для визначення кінцевого титру або збільшення титру в 2-4 рази (сероконверсія).