Дерматофітоз
Мікробіологічне поживне середовище для культивування та детекції дерматофитів у домашніх тварин. Високоінфекційне захворювання шкіри із зоонозним потенціалом.
Дерматофітози – найпоширеніші інфекційні шкірні захворювання домашніх тварин та людей (зоонози). Вони викликані дерматофітами, ниткоподібними грибами, які використовують кератин шкіри, волосся, кігтів та рогів як джерело вуглецю.
Клінічно найбільш значущі ветеринарні види:
Epidermophyton persicolor
Важливу роль у розвитку стригучого лишаю, крім: віку та імуносупресії, розведення (особливо перські кішки), умов утримання (розведення, притулки для тварин, утриманняз тваринами різних видів), подорожей, лактації (передача інфекції цуценятам), також відіграє – інфікування ектопаразитами. Теплий вологий клімат діє, як додатковий каталізатор у розвитку захворювання.
Діагностика
У разі клінічної підозри на дерматофітоз: плями алопеції, (часто без свербежу), мікробіологічний висів на живильному середовищі є найбільш надійним діагностичним методом детекції.
MEGACOR Diagnostik GmbH пропонує два різних формату для м/б детекції:
- MYKODERMOASSAY DTM, класичне середовище для дерматофітів у культуральних флаконах з агаром;
- MYKODERMOASSAY TRIO, інноваційний формат у чашці Петрі з комбінацією трьох поживних середовищ
Обидва формати тестування гарантують швидку детекцію шляхом зміни кольору м/б середовища DTM або ESA. Крім того, ESA – оптимізоване середовище для надійної візуальної та мікроскопічної диференціації дерматофитів.
SAB/SDA – «універсальний агар», забезпечує більш швидке зростання у порівнянні з DTM та ESA, також живильне середовище залишається прозорим, що дозволяє провести двосторонню оцінку зростання колоній.
MYKODERMOASSAY DTM – 12 пробіркок;
MYKODERMOASSAY TRIO – 5 чашок Петрі з мікробіологічними петлями.
ВМІСТ ТЕСТ-НАБОРУ MYKODERMOASSAY TRIO:
– 5 чашок Петрі, кожна з агарами: DTM / ESA / SAB
– 5 стерильних одноразових зубних щіток
– Інструкція
ІНФОРМАЦІЯ ПРО МАТЕРІАЛ ЗРАЗКА
Відбір зразків слід проводити до початку терапії!
Взяття якісного зразка (кількість/ступінь чистоти) є критичним кроком для ідентифікації дерматофітів. Чим більше волосся, лупи та/або зішкрібків використовується, тим менша ймовірність отримати хибнонегативний результат. Ріст а отже, ідентифікація дерматофітів у поживному середовищі залежить як від кількості так і від обраної ділянки взяття зразка.
ЗБІР ТА ПІДГОТОВКА ЗРАЗКІВ
а. У разі утворення конденсату через коливання температури відкрийте чашку Петрі та струсіть конденсат з кришки. Або помістіть чашку Петрі та кришку окремо, догори дном в інкубатор (37 °C ) приблизно на 30 хвилин. Цей крок не впливає на тестування!
б. Очистіть обрану зону відбору проб 70 % спиртом, щоб зменшити потенційне бактеріальне та/або сапрофітне забруднення.
в. Зішкріб зі шкіри або волосся з коренем, лупу та струпи знімають з краю ураження. Рівномірно розподіліть матеріал та нанесіть одношарово на три різні поверхні агару
г. Вийміть зубну щітку з фольгованої упаковки. Інтенсивно почистіть щіткою в безпосередній близькості від усіх уражень шкіри, особливо в перехідній зоні між шкірою і початком шерсті
ґ. Вийміть зубну щітку з фольгованої упаковки. Ретельно обробіть щіткою ділянки, що безпосередньо оточують всі ураження шкіри, особливо в перехідній зоні між шкірою та хутром.
д. Стерильним скальпелем або пінцетом зніміть зібраний матеріал зі щітки та розподіліть його рівномірним моно-шаром на три поверхні агару, також.
ПРОЦЕДУРА ВИПРОБУВАННЯ
- Заражений матеріал зразка слід розподіляти обережно, не пошкоджуючи середовище. Злегка притисніть зразок матеріалу головкою зубної щітки. Чим щільніше контакт зразка з середовищем, тим швидше відбувається зміна кольору та ріст. Периферійна зона (приблизно 5-10 мм) чашки Петрі повинна залишатися вільною, щоб забезпечити раннє розпізнавання можливого забруднення спорами плісняви, що переносяться повітряно-крапельним шляхом.
- Закрийте чашку Петрі, заклейте її самоклеючою стрічкою або парафіном та інкубуйте догори дном при 25-32 °C (77-90 °F) при кімнатному освітленні (без потрапляння прямих сонячних променів!). Більш високі температури уповільнюють ріст грибкових клітин.
- Щодня протягом 21 дня перевіряйте посіви на предмет зміну кольору та росту колоній. Щоб уникнути хибно позитивного результату, важливо розпізнати ріст небажаних колоній сапрофітів (“розвиток плісняви”).
РЕЗУЛЬТАТ ВИПРОБУВАННЯ
Зміна кольору: у DTM та ESA через 2-3 дні, в середньому через 3-7 днів, перші прояви росту дерматофітів.
DTM: від помаранчевого до червоного
ESA: від жовтого до зелено-синього.
Увага: одноразова зміна кольору лише одного агару не є достовірною ознакою росту колоній дерматофітів
- Ріст колоній (DTM / ESA / SAB) в середньому через 5-10 днів. Зазвичай з’являються білуваті та частково забарвлені колонії. У цьому випадку вони мають жовто-коричневий колір з боку агару колонії (переверніть чашку Петрі догори дном!).
Лише червоне забарвлення навколо білуватої, злегка жовтуватої або світло-помаранчевої, вовняно-пухнастої колонії вказує на ріст патогенного дерматофіту.
Колонії пліснявих грибів можна розпізнати за забарвленим (чорно-сіро-зелено-коричневим).
Макроскопічна-візуальна оцінка колоній:
Ідентифікацію можна провести за розміром, формою та кольором колоній, а також за структурою їхньої поверхні та текстурою країв.
Мікроскопічна оцінка (збільшення у 100-400 разів): Візьміть зразки, знятими з різних ділянок колонії та/або у різний час. У ” бавовняних ” ділянках можна знайти більше гіфів, тоді як у сухих, як гіпс, ділянках можна знайти більше спор. Ідентифікація проводиться за такими критеріями: прояв, ширина та розділення гіфів, однорідність міцелію, утворення спіральних гіфів та/або хламідоспор, утворення мікро- (особливо Trichophyton) та/або макроконідій (особливо Microsporum).
ІНТЕРПРЕТАЦІЯ РЕЗУЛЬТАТІВ
Інтерпретація результату тесту завжди ґрунтуватися на історії хвороби та клінічних даних пацієнта.
* візуально (ріст колоній) та мікроскопічно (поділ гіф, мікро- та макроконідії)
