TECO® Feline & Canine Haptoglobin – імуноферментна тест система для кількісного визначення гаптоглобіну в плазмі та сироватці крові котів та собак.
Гаптоглобін, білок гострої фази, є частиною імунної системи, що бере участь у захисних механізмах організму та міститься в крові багатьох видів тварин. За нормальних умов гаптоглобін або відсутній у крові, або присутній у дуже малих кількостях. Однак рівень гаптоглобіну може значно підвищитися у відповідь на гостру інфекцію, запалення або травму.
Вимірювання гаптоглобіну використовується для діагностики та спостереження за запальними процесами. Хоча гаптоглобін не є специфічним для захворювання, виявлення підвищеного рівня гаптоглобіну є цінною ознакою наявності запальних процесів.
Гаптоглобін є надійним показником для:
- Швидкого та легкого виявлення запальних процесів
- Показника респіраторних та ортопедичних розладів
- Моніторингу терапії (імуноопосередковані запальні процеси)
- Скринінгу перед операцією та спостереження після неї
- Допомоги в діагностиці інфекційних захворювань
- Скринінгу стану здоров’я
- Корисного як частина медичних оглядів
- Раку
Принцип методу
У тесті використовуються афінно очищені антитіла до гаптоглобіну, іммобілізовані на твердій фазі (мікротитровальні лунки). Попередньо розведені зразки інкубують у лунках мікротитрувального планшета протягом 60 хвилин. Потім лунки мікротитрувального планшета промивають, додають антитіла до гаптоглобіну, кон’юговані з пероксидазою хрону (HRP), та інкубують протягом 30 хвилин для виявлення. Після інкубації незв’язані антитіла, мічені HRP, змивають.
Додається субстрат TMB, який реагує з HRP і утворює колір, інтенсивність якого залежить від концентрації. Реакція зупиняється за допомогою HCl, який змінює колір з синього на жовтий, і пластина зчитується за допомогою пластинного зчитувача при 450 нм.
Інтенсивність кольору пропорційна кількості гаптоглобіну в зразку.
Необхідні матеріали, що не входять до комплекту
• Піпетка, здатна точно дозувати 10–100 мкл та 100–1000 мкл.
• Багатоканальна піпетка на 100 мкл.
• Градуйовані циліндри для відновлення або розведення реагентів.
• Автоматична мийка або еквівалентна система миття планшетів.
• Дистильована або деіонізована вода.
• Вортекс.
• Шейкер для планшетів ІФА(орбітальний шейкер, 500 об/хв).
• Сканер для планшетів ІФА, придатний для форматів з 96 лунками та здатний вимірювати при 450 нм
(еталонний фільтр: 590–650 нм).
• Програмне забезпечення для сканера для планшетів ІФА для генерації та аналізу даних.
Підготовка зразків
Рекомендується використовувати сироватку крові котів або собак без ліпемії.
Зібрані зразки крові центрифугувати протягом 4 годин.
Зразки зберігають стабільність протягом 72 годин при температурі 2–8 °C або кімнатній температурі, при тривалому зберіганні — при температурі -20 °C або -70 °C.
Максимально допустима кількість циклів заморожування та розморожування — 3.
Референтні значення
- Сироватка здорових котів < 3 мг/мл
- Сироватка здорових собак < 2,7 мг/мл
