Фарба нуклеїнових кислот (зелена) – альтернатива традиційному фарбуванню бромістим етидієм (EB) для виявлення нуклеїнової кислоти в агарозних гелях. Зелена флуоресценція при зв’язуванні з ДНК або РНК. Фарба має два флуоресцентних максимума збудження. При зв’язуванні з нуклеїновою кислотою – 267 нм, а інше при 294 нм. Крім того має одне видиме збудження при 491 нм. Флуоресцентне випромінювання зв’язаного з ДНК при 530 нм.

Зберігання: 

Зберігати при 4°C протягом 2 років.

Протокол:

1. Приготуйте 100 мл розчину агарозного гелю (концентрація 0,8~2%) у колбі ємністю 250 мл та ретельно перемішайте. Поставте колбу у мікрохвильову піч, нагрійте її, поки розчин не стане повністю прозорим (приблизно 2-3 хвилини).
2. Додайте 2-5 мкл фарби до розчину гелю. Обережно покрутіть колбу, щоб перемішати розчин та уникнути утворення бульбашок.

3. Поки розчин гелю охолоне, налийте його у лоток для гелю до зубців гребінця та занурте у розчин гелю приблизно на 1/4~1/2 .

4. Дайте гелю охолонути до застигання. Завантажте зразки у гель та виконайте електрофорез.
5. Спостерігайте смуги під УФ-освітленням.

Примітка
1. Товщина гелю повинна бути менше 0,5 см, оскільки густі гелі можуть знизити чутливість.
2. Повторне розплавлення гелів, що містять “Фарба нуклеїнових кислот (зелена)” призводить до часткової втрати чутливості.
3. “Фарба нуклеїнових кислот (зелена)” дозволяє візуалізувати ДНК (<10 нг) в агарозному гелі під видимим спектром світла. Це усуває необхідність впливу ультрафіолетового випромінювання, яке може пошкодити ДНК. Неушкоджені фрагменти ДНК, очищені від агарозного гелю, можуть підвищити ефективність наступних молекулярно-біологічних маніпуляцій, таких як клонування, трансформація та транскрипція.
4. Фарба може викликати подразнення шкіри та очей. Під час роботи надягайте рукавички.