Зворотня транскриптаза M-MLV є РНК-залежною ДНК-полімеразою. Має як РНК, так і ДНК-полімерну активність. Використовується для синтезу компліментарного ланцюга ДНК (кДНК) довжиною понад 5 т.п.н. Рекомбінантна зворотна транскриптаза є продуктом гена pol вірусу лейкозу мишей Молоні (Moloney Murine Leukemia Virus, M-MLV).
Вміст:
- M-MLV 200 Од./мкл – 25 мкл
- 5х буфер (першого ланцюга) – 100 мкл
Одиниця активності:
За одну одиницю активноcті приймається кількість ферменту, необхідна для включення 1 нмоль дНТФ у кислотно-нерозчинну фракцію за 10 хвилин при + 37 °С з використанням полі (А) + олиго (дТ)15 у якості мішені.
Буфер для зберігання:
20 мМ Тріс-НСl (рН 7,5)
200 мМ NaCl
0,1 мМ ЕДТА
1мМ DTT
0,01% 4- нонілфеніл-поліетиленгліколь
50% водний розчин гліцерину
5 × буфер першого ланцюга
250 мМ Тріс-HCl (pH 8,3 при 25 °C)
375 мМ KCl
15 мМ MgCl2
50 мМ DTT
Застосування:
Синтез першого ланцюга кДНК
- ПЛР (див. Протокол для синтезу першого ланцюга кДНК);
- Синтез другого ланцюга кДНК;
- Міченні ДНК;
- ПЛР у реальному часі;
- Секвенуванні;
- Аналізі РНК
Зберігання:
Усі компоненти при -20°С
Термін придатності:
1 рік


