Taq-полімераза 5 Од./мкл – 100 мкл
Термостабільна, рекомбінантна ДНК Taq-полімераза з термофільної бактерії Thermus aquaticus. Фермент каталізує синтез ДНК у напрямку 5 ‘-> 3’, не володіє 3 ‘-> 5’ екзонуклеазною активністю та має низьку 5 ‘-> 3′ екзонуклеазну активність. Володіє трансферазною активністю, що проявляється у здатності приєднувати додатковий адениновий залишок до 3’-кінця синтезованого ланцюга. Полімераза здатна вбудовувати модифіковані нуклеотиди – біотінильовані або флуоресцентно-мічені.
ДНК полімераза – фермент, який бере участь у реплікації ДНК. Ферменти цього класу каталізують полімеризацію дезоксирибонуклеотидов уздовж ланцюжка нуклеотидів ДНК, яку фермент «читає» та використовує як шаблон. Тип нового нуклеотиду визначається за принципом комплементарності із шаблоном, з якого ведеться зчитування. Зібрана молекула комплементарна шаблонної моноспіралі та ідентична другому компоненту подвійної спіралі.
Недолік цієї полімерази полягає у досить високій ймовірність внесення помилкового нуклеотиду, так як у цього ферменту відсутні механізми виправлення помилок (3 ‘→ 5’-екзонуклеазная активність).
Полімерази Pfu та Pwo, виділені з архей, значно зменшують число мутацій у ДНК, але швидкість їх роботи (процесивність) нижче, ніж у Taq. Зараз застосовують суміші Taq та Pfu, щоб досягти одночасно високу швидкість полімеризації та високу точность копіювання.
Активність:
За одну одиницю активноcті приймається приймається кількість ферменту, необхідна для включення 10 нмоль дНТФ у кислотно – нерозчинну фракцію за 30 хвилин при +74°С.
Буфер для зберігання:
- 20 мМ Трис-НСl (рН 8,0)
- 100 мМ KCl
- 3,2 мМ MgCl2
- 1 мМ DTT
- 0,1% Тритон Х-1000,1% Твін 20,
- 0,2 мг/мл БСА
- 50% водний розчин гліцерину
- 10 х ПЛР буфер з Mg2+
- 100 мМ Трис-НСl (рН 8,0)
- 500 мМ KCl
- 16 мМ MgCl2
- 1% Тритон Х-100
Застосування:
- Рутинній ампліфікації;
- Високопродуктивній ПЛР;
- Міченні ДНК;
- Секвенуванні
Точність:
Становить 4,5 х 10–4, тобто ймовірність помилки становить 2,2 х 10-5 на 1 цикл. Час напівжиття ферменту при + 95оС – не менше 40 хвилин.
Умови транспортування:
Дозволяється транспортувати при +18 … + 25 оС не більше 3-х діб.
Зберігання:
Всі компоненти при -20 оС
Термін придатності:
1 рік
Для дослідницьких цілей



