Інгібітор РНКази – рекомбінантний інгібітор РНКази, експресований у розчинній формі у E. coli. Може інгібувати широкий спектр РНКаз (РНКази А, В, С). Був протестований методами: ЗТ-ПЛР; РТ-кПЛР. Сумісний із різними зворотними транскриптазами та ДНК-полімеразами.
У порівнянні з інгібіторами РНКази (людини), мишачий інгібітор РНКази не містять двох дуже чутливих до окислення цистеїнів білків людини, тому має більш високу антиоксидантну активність та підходять для експериментів з високою чутливістю до DTT, таких як кПЛР (qPCR).
Визначення одиниці
Кількість ферменту, необхідного для інгібування 50% активності 5 нг РНКази А, визначається як 1 одиниця активності (U). Активність РНКази А отримують шляхом гідролізу 2 ‘, 3’ – CMP з утворенням 3 ‘-CMP.
Контроль якості
Виявлення залишків екзонуклеази: 200 Од. цього продукту та 0,6 мкг λ-Hind III інкубували при 37 °С протягом 16 годин,= смуги ДНК не змінювалися після електрофорезу. Виявлення залишку ендонуклеази: 200 Од. цього продукту та 0,6 мкг суперспіральної ДНК pBR322 інкубували при 37 °С протягом 4 годин – смуги ДНК не змінювалися після електрофорезу.
Застосування
- Синтез першого ланцюга кДНК
- Виділення полісом
- Транскрипція in vitro
