РНазін – інгібітор рибонуклеази, білок виділяється з плаценти людини. РНазін пригнічує РНКази типу A. РНазін не пригнічує полімерази та нуклеази: Taq полімерази, MMLV та AMV зворотні транскрітпази, SP6, T7, T3 полімерази, S1 нуклеазу та деякі рибонуклеази – РНКаз Т1 та РНКаз Н. Не містить ендодезоксірібонуклеаз, екзодезоксірібонуклеаз, рибонуклеаз та фосфатаз.
Буфер для зберігання:
20 мМ HEPES-NaOH (pH 7,5);
50 мМ NaCl;
8 мМ ДТТ;
0,5 мМ детергента;
50% гліцерину.
Активність:
За одну одиницю актівноcті приймається кількість ферменту, необхідне для 50% інгібування 5нг Рибонуклеази А.
Активність інгібітору оцінюють в суміші:
100 мМ Тріс-HCl (рН 7,5)
1,2 мМ ЕДТА
0,1 мг/мл БСА
100 нг/мл РНКази А
0,1мг/мл E.coli [3H] РНК
50 мг/мл дріжджової РНК
8 мМ ДТТ
Застосування:
- Транскрипція in vitro;
- Синтез кДНК;
- Виділення клітинних фракцій ссавців, що містять мРНК білковий комплекс;
- Поділ та ідентифікація специфічних рибонуклеазних активностей.
Інгібітори та інактивація:
- Інгібітори: SDS, сечовина та всі окислюючі реагенти (n-хлормеркурібензоат, розчинений кисень, іони у їх більш високій ступені окислення).
- Інактивується нагріванням до 75°C протягом 10 хвилин. Залишкова активність виявляється через 10 хв. після нагрівання до 70°C.
ПРИМІТКА:
Наявність ДТТ у буфері для зберігання не є обов’язковою, однак підвищує стабільність та збільшує термін зберігання. Рекомендована концентрація: 1 од./мкл
Зберігання:
Всі компоненти при -20оС
Термін придатності:
1 рік
Тільки для дослідницьких цілей.
