SYBR Green кПЛР Мікс (0,2% Rox +) призначен для високоспецифічної ПЛР у реальному часі з інтеркаліруючим барвником SYBR Green та референсним барвником ROX. Пасивний референсний барвник ROX забезпечує нормування сигналів репортерної флуоресценції, що дозволяє коригувати флуктуацію сигналів між пробами у межах експерименту.
Барвник SYBR Green зв’язується з дволанцюговою ДНК, забезпечуючи флуоресцентний сигнал, який відображає кількість продуктів отриманих в ході ПЛР.
Мікс містить всі необхідні для ПЛР компоненти, крім праймерів та матричної ДНК. Для постановки реакції у суміш потрібно додати праймери, матричну ДНК та ПЛР воду.
Реакційний буфер оптимізован для специфічної роботи Хот Старт Taq – полімерази, а також для тривалого зберігання та багаторазового заморожування-розморожування суміші.
Мікс розроблений для проведення ПЛР та детекції на обладнанні: ABI® ( Applied Biosystems®).
Підходить для ампліфікаторов, що вимагають низької концентрації барвника ROX у реакції (фінальна концентрація 50 нМ):
ABI ® 7500 qPCR Systems, ViiA™ 7, QuantStudio™ 12KFlex, Agilent Mx3000P™ Mx3005P™ and Mx4000™ .
Застосування:
- Аналізу експресії генів
- Перевірки мікрочіпів
- Перевірка «нокдауну» гена
Склад міксу:
100 мМ KCl,
5 мМ MgCl2,
400 мкл дНТФ,
0,1 од./мкл Хот Старт Taq – полімерази,
1x SYBR Green I
0,2% барвник ROX
та інші оптимізовані компоненти буфера.
Основний ПЛР протокол:
Цей протокол призначений для використання з: ABI ® 7500 qPCR Systems, ViiA™ 7, QuantStudio™ 12KFlex, Agilent Mx3000P™, Mx3005P™ и Mx4000™. Підходить для ампліфікаторов, що вимагають низької концентрації барвника ROX у реакції (фінальна концентрація 50 нМ):
